Forklaret: Hvorfor tester flere mennesker med Covid-symptomer negative?
Mange mennesker med Covid-19 symptomer har testet negative. Der er flere sandsynlige årsager, såsom mutationer af virus, der undslipper påvisning, kvaliteten af prøveudtagning og testning og effektiviteten af RT-PCR-kits.

Mens Indien kæmper for at klare den hidtil usete efterspørgsel efter RT-PCR-tests, tyder rapporter på, at op til 20 % symptomatiske Covid-19-patienter tester negative.
Denne tilsyneladende tendens med falsk negative resultater kan nægte alvorlige patienter hospitalsindlæggelse og kritisk behandling, mens de lader asymptomatiske bevæge sig rundt og sprede virussen. Tendensen har fået eksperter, herunder AIIMS-direktør Dr. Randeep Guleria, til at anbefale Covid-19-behandling til alle, der viser klassiske symptomer, uanset RT-PCR-resultater.
Nyhedsbrev| Klik for at få dagens bedste forklaringer i din indbakke
Hvorfor falske negativer
RT-PCR-tests, der betragtes som guldstandarden i diagnosticeringen af Covid-19, er ikke beregnet til at være perfekte. Den mindste følsomhed (evne til at påvise positive) krævet af Indian Council of Medical Research (ICMR) for at validere en RT-PCR-test er 95 %. Det betyder, at der forventes op til 5 % falsk negative resultater.
Mens anekdotiske rapporter tyder på, at andelen af falske negative resultater er stigende i hele Indien, er der endnu ingen undersøgelse, der understøtter dette.
I teorien bestemmer fire brede faktorer nøjagtigheden af en RT-PCR-test: den virale belastning i personen, kvaliteten af prøveindsamling og -behandling, effektiviteten af selve testkittet og også benchmark for testfortolkning.
VIRAL LOAD: Typisk manifesterer Covid-19 sig tilstrækkeligt på den femte dag i en infektionscyklus. Testet tidligere efter eksponering, kan en inficeret person vise sig at være Covid-negativ. Dette er muligvis ikke en væsentlig faktor bag den seneste falske negative tendens, da visse Covid-19-mutanter tilsyneladende viser tidlige symptomer.
En række symptomatiske patienter, som testede falsk negative i RT-PCR-assays, er efterfølgende blevet bekræftet som covid-positive i Bronchoalveolar Lavage (BAL)-test, der indsamler prøver fra de nedre luftveje gennem et bronkoskop. Dette har ført til formodninger om, at visse mutanter omgår de øvre luftveje for at målrette mod lungen - et scenario, der kan nægte en RT-PCR-test, baseret på prøve indsamlet fra næsehulen og halsen, den virale belastning, der kræves for et nøjagtigt resultat.
cole spire nettoværdi 2017
KAPACITETSEKSPLOSION: Antallet af Covid-testlaboratorier i Indien steg fra 14 i februar 2020 til mere end 2.400 i april 2021. En sådan hurtig udvidelse krævede godkendelse af hundredvis af laboratorier til RT-PCR-test og træning af tusindvis af teknikere i en fart.
Som en sikkerhedsforanstaltning listede ICMR i juli 2020 30 kvalitetskontrollaboratorier for at kontrollere alle de Covid-laboratorier, den godkendte. Yderligere 8 QC-laboratorier er blevet tilføjet siden. Kilder i flere laboratorier i tre stater sagde imidlertid, at kun få inspektioner af faciliteter og instrumenter fandt sted.
Ideelt set bør en blanding af positive og negative prøver afhentes tilfældigt fra hvert laboratorium med jævne mellemrum til gentestning. Blev det nogensinde gjort? Ja. Blev det gjort konsekvent? Nej, sagde en videnskabsmand med et ICMR-institut, som ikke er autoriseret til at tale med medierne.
ICMR og en række QC-laboratorier har været tavse, efter at have henvendt sig til periodisk laboratorieovervågning og kvalitetsoverholdelsesdata siden juli 2020.
MENNESKELIGE ELEMENT: Test kan gå galt på forskellige stadier - fra dårlig prøveopsamling og opbevaring til fejlagtig ekstraktion og amplifikation. Alle RT-PCR-kits inkluderer en intern kontrol (IC) for at sikre mod et scenario, hvor intet RNA ekstraheres/amplificeres, hvilket fører til en falsk negativ. IC'en kan være eksogen eller endogen. Det er eksogent, når et kunstigt RNA-skabelonmolekyle tilsættes til hver prøve før RNA-ekstraktion. Testen betragtes som ugyldig, når det syntetiske RNA ikke påvises efter ekstraktion, og en gentest er ordineret. Og en endogen kontrol bruger et humant 'husholdnings'-gen til stede i prøven; dens manglende påvisning efter RNA-ekstraktionsproceduren gør testen ugyldig.
Et humant husholdningsgen sikrer også prøvekvaliteten... Men over 75 % RT-PCR-sæt på det indiske marked bruger de billigere eksogene interne kontroller, sagde en Mumbai-baseret molekylærbiolog.
ICMRs SOP fra april 2020 om RT-PCR fastslog, at eksogen kontrol til ekstraktion kan ignoreres, da den ikke vil afspejle kvaliteten af den indsamlede prøve. Det anbefalede, at separat RNase P eller ethvert andet humant husholdningsgen... bør køres parallelt i et separat rør... (for at) kontrollere både kvaliteten af den indsamlede prøve og ekstraktionsproceduren.
I maj 2020 lancerede megaudbuddet af ICMR/HLL for RT-PCR-kits lignende krav. En række producenter hævdede, at forskellige virksomheder bruger forskellige interne kontroller, herunder eksogene, som blev godkendt af regulerende agenturer som FDA og CEIVD, og at negativ udvælgelse baseret på husholdningsgener ville modvirke fair konkurrence. Til sidst blev udbuddet revideret til at omfatte både endogene og eksogene muligheder for intern kontrol.
VIRAL MUTATION: En RTR-PCR-test retter sig mod specifikke områder af et eller flere virale gener for at påvise dets tilstedeværelse. En test kan returnere falsk negative resultater, hvis der opstår en mutation i det segment af det vurderede genom. Tests, der bruger flere genetiske mål, som dem der bruges i Indien, er mindre tilbøjelige til at blive narre af mutationer.
gen simmons højde
Regulatorer som f.eks. US FDA overvåger rutinemæssigt virkningen af mutationer på RT-PCR-tests Mens eksperter som Dr. Rakesh Mishra, direktør for Hyderabad's Center for Cellular and Molecular Biology (CCMB), mener, at ICMR bør igangsætte en lignende øvelse, er det muligvis ikke let at overvåge i realtid over 200 RT-PCR-kits godkendt i Indien mod nye mutationer.
For det første har (eller vil) ingen producent offentliggjort de detaljerede sekvenser, som deres test målretter mod. Mens de indsender til validering til ICMR, nævner de kun målgenerne og ikke primersekvensen, sagde en seniorforsker ved sundhedsministeriet.
Indtil nu er der dog grund til at føle sig temmelig selvsikker, selv i fraværet af et effekttjek i realtid. Indtil videre har Covid-19-varianter hovedsageligt S-gen (spidsprotein) mutationer. De fleste kits her bruger bevarede (uændrede) områder af mål, sagde Dr. Shanta Dutta, direktør for National Institute of Cholera and Enteric Diseases (NICED), Kolkata.
Prisnedbrud
På et år faldt prisen på RT-PCR-sættet fra over 1.100 Rs til under 40 Rs. Siden importafgiftsfritagelsen blev trukket tilbage i oktober 2020, forlod de fleste udenlandske mærker det indiske marked på grund af den ekstra omkostningsbyrde på 15 %. En række indiske mærker har også nægtet at sælge under 100 Rs. Mange har fundet dedikerede erhvervskunder, som ikke har noget imod at betale lidt ekstra for at sikre kvalitet. Nogle tilbyder endda flere PCR-sæt til forskellige prisniveauer.
Selvom ingen siger det på journal, stiller mange spørgsmålstegn ved kvaliteten af den billigere konkurrence. Modsynet er, at hvert testkit, der er tilgængeligt på markedet, opfylder ICMRs valideringsbenchmarks, og at enhver priskrig i sidste ende kommer forbrugeren til gode.
Ikke alle er dog overbeviste. Det tilsvarende fald i omkostningerne til laboratorietesten er fra 4.500 til 800 Rs. Ved man, der besøger sit lokale laboratorium til en Covid-test, desuden, hvilket sæt der bruges? Hvor mange laboratorier vil bruge 100 Rs, når de kan slippe af sted med at bruge et Rs-40-kit? sagde en af de første indiske producenter af Covid PCR-sæt.
DELTAG NU :Express Explained Telegram Channel
Det Ct værdi
En RT-PCR-test amplificerer nukleinsyren ekstraheret fra prøven for at påvise den, der er specifik for Covid-19-virussen. Forstærkningen sker i cyklusser med en tærskelværdi (Ct). Det er klart, at jo højere viral tilstedeværelse/belastning, jo lavere er Ct-værdien eller antallet af amplifikationscyklusser, der kræves for at gøre det detekterbart.
ICMR indstiller Ct-værdien til 35 for negative resultater. Ud over dette anses ethvert spor af potentielt tilstedeværende virus for at være ubetydeligt, og prøven er dømt som Covid-negativ.
Men visse stater, såsom Maharashtra, forsøgte at strække grænsen for tilladelighed ved at foreslå en Ct-værdi på 24. Da dette potentielt ville udelukke et stort antal mennesker med kvantitativt lavere, men klinisk signifikant viral belastning, gentog ICMR sin holdning til en Ct-værdi på 35 .
Der er dog ringe klarhed, hvis alle stater følger det samme Ct-benchmark. Ifølge ledende medarbejdere i mindst to multi-state laboratorienetværk har de modtaget modstridende og til tider uberettigede verbale instruktioner om sådanne testparametre. Selv en molekylær test er ikke immun over for subjektiv bias.
Del Med Dine Venner: